移液枪是实验室中常用的精确测量和转移液体的工具,正确使用移液枪不仅关系到实验结果的准确性,还关系到实验人员的安全。因此,掌握移液枪的正确使用方法和注意事项至关重要。 您知道吗,如果只是简单地遵从接下来这些技巧,您移液的准确性和重复性将可能会得到5%的提高。
大多数移液器的正常操作体积范围是指示量程的(10-100)%。 尽管这一范围是可操作范围,但随着体积设定的下降性能参数将会发生变化。
100uL移液器的准确性参数在指示量程的50-100%的时为±0.8%。 然而如果你移取10μL(或者指示量程的10%),不准确度将会提高3倍,或者为(2.5-3)%。
所以获得最佳性能的 最优量程范围是指示量程的35-100% 。尽量避免将一个移液器的体积设定少于最大体积的10%,而应该用小量程的移液器来进行小体积移液操作。
正确的吸头浸入深度可以提高准确性高达5%,尤其对微量移液器相当重要。 对于微量移液器,吸头应该浸入(1-2)mm,而对于大量程的移液器,浸入深度应为(6-10)mm。
如果吸头浸入太深,吸头内部的空气就会被压缩,造成过多的液体被吸入。 残留在吸头表面的液体也可能会影响结果。
吸头如果浸入不够充分,那么可能会吸入空气,就会造成气泡的形成和移取体积不准。 两者都会造成不准确的移液体积,
吸液时吸头尽可能以90度角浸入到样品中,最好不要偏离垂直位置超过20°对于微量体积的移液器,以垂直角度移取溶液可以提高2.5%的准确性。
偏离垂直超过20°吸液将会导致不准确的量取-过多的液体将会被吸入,造成移液不准确。 以60度角浸入,将会使你的液体吸取量超过所设定的0.7%。
保持一致的移液节奏和速度将会帮助你得到理想的、重复性更高的结果。 保持节奏和速度的一致性可以将准确性提高5%。
润洗吸头2-3次可以在吸头内形成同质膜,这样可以提高0.2%的准确度性。
润洗可以中和bob半岛在线登录微量移液中的毛细效应,对于大体积移液,这可以使吸头内部温度与样品温度一致。
当移取热的和冷的溶液时润洗会对结果产生不利影响,如从冰浴中移液或者溶液温度超过37摄氏度,润洗可能会造成高达5%的错误率。
恒定的室温:移液和校准的理想温度是21.5℃±1℃。 避免在有风或者有阳光直射,温度变化较大的区域操作,这些区域可能会降低移液的精准度。
保证足够的平衡时间:除非另有其他要求,否则请保证足够的时间来使您的液体样品和移液器达到平衡温度。
手温效应长时间使用移液器,来自手的热量可能会加热移液器-导致移液器内部的空气受热膨胀从而会产生不准确的结果。
6.1.准备超纯水、万分之一天平(如果校正 0.5~2.5ul量程的,至少要十万分之的天平)、温湿度计、恒温室,还需准备一个小口容器,防止水分挥发。
6.2.按移液器总量程的 100%、50%、10%分别进行第三和第四步。
6.3.吸头要反复吸取超纯水三次后,吸取固定容积的超纯水,推入放置在天平上的小口容器中,待数据稳定读取天平数值,同时记录温度。重复 10次。
6.4.将测量的数据用 ISO8655 中的计算公式计算获得对应温度下的体积,取平均值。
6.5.根据三个测量点的偏差,用移液器专用的校正扳手通过移液器的校正窗进行调整。
如不使用,要把移液枪的量程调至最大值的刻度,使弹簧处于松弛状态以保护弹簧。
最好定期清洗移液枪,可以用肥皂水或60%的异丙醇,再用蒸馏水清洗,自然晾干。
使用时要检查是否有漏液现象。方法是吸取液体后悬空垂直放置几秒中,方法时吸取液体后悬空垂直放置几秒中,看看液面是否下 降。
如今全自动仪器的推进,移液枪使用的频率越来越少了,习惯了机器自动加样,反而导致一部分人不会正确使用传统移液枪,但是移液枪在转移标本或者质控品的时候,又不能没有。本文详细介绍了移液过程中的如何提高精度,比如做BCA项目,润洗枪头和不润洗差距很大,看完本篇文章,你应该会了吧?